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  • 禽流感病毒H5N1核酸檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法)

    對(duì)樣本中流感病毒H5N1亞型RNA進(jìn)行檢測(cè),適用于流感病毒H5N1型感染的輔助診斷及流行病學(xué)調(diào)查。

    • 產(chǎn)品品牌: REAGEN
    • 產(chǎn)品貨號(hào): RNS92049
    • 產(chǎn)品規(guī)格: 20T
    • 產(chǎn)品適用: 禽流感病毒H5N1的檢測(cè)和判定
    • 產(chǎn)地來(lái)源: 深圳

    【產(chǎn)品名稱】

    通用名稱:禽流感病毒H5N1核酸檢測(cè)試劑盒(熒光PCR)

    【包裝規(guī)格】

    50人份/

    【預(yù)期用途】

    對(duì)樣本中流感病毒H5N1亞型RNA進(jìn)行檢測(cè),適用于流感病毒H5N1型感染的輔助診斷及流行病學(xué)調(diào)查。

    【檢驗(yàn)原理】

    本試劑盒采用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)結(jié)合Taqman技術(shù),對(duì)禽流感病毒H5N1亞型的特異性核酸片段進(jìn)行熒光PCR檢測(cè)。

    【主要成分】

     

    組分成分

    50人份/

    主要成分

    規(guī)格

    數(shù)量

     

     

    PCR反應(yīng)液

     

     

    884μL /

     

    1

    引物、探針、脫氧核糖核苷三磷酸(dNTP)、緩沖體系

     

    酶混合液

    156μL /

    1

    Taq酶、MMLV

    陽(yáng)性對(duì)照

    200μL /

    1

    含目的片段的質(zhì)粒

    陰性對(duì)照

    500μL /

    1

    無(wú)核酸酶水

     【儲(chǔ)存條件及有效期】

    試劑置于-30~-15避光保存,有效期為12個(gè)月。本產(chǎn)品反復(fù)凍融應(yīng)不超過(guò)5。

    【適用儀器】

    熒光定量PCR儀:ABI 7500熒光PCR.ABI Quantstudio5 ;Gentier 96R;SLAN-96P全自動(dòng)醫(yī)用PCR分析系統(tǒng)。

    【樣本要求】

    1. 適用樣本

    咽拭子:應(yīng)使用專用采樣拭子,適度拭抹咽后壁和兩側(cè)扁桃體部位;迅速將拭子放入標(biāo)本采集管中,旋緊管蓋并密封,以防干燥。                                      

    全血:疑似感染動(dòng)物的靜脈血2mLEDTA-2Na抗凝管,8000rpm離心2min,取適量上清液于1.5mL滅菌離心管中。

    2. 樣本運(yùn)輸和保存

    上述標(biāo)本短期內(nèi)可保存于-20℃,長(zhǎng)期保存可置-70,但不能超過(guò)6個(gè)月,標(biāo)本運(yùn)送應(yīng)采用2~8℃冰袋運(yùn)輸,嚴(yán)禁反復(fù)凍融

     【檢驗(yàn)方法】

      1. 樣本處理

    取待測(cè)樣本200ul,按照核酸提取試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行核酸提取。

      2. 試劑配置(在準(zhǔn)備區(qū)進(jìn)行,與擴(kuò)增區(qū)分開,冰上操作

    注:試劑使用前要完全解凍,使用前渦旋混勻,10000 rpm離心5 s,確保試劑完全離心至管底,否則會(huì)出現(xiàn)裝量差異的現(xiàn)象。

    若有N個(gè)待檢測(cè)樣本,則需配置N+2擴(kuò)增反應(yīng)(待檢樣本數(shù)N+1個(gè)陽(yáng)性質(zhì)控品+1個(gè)陰性質(zhì)控品,按下表要求進(jìn)行擴(kuò)增反應(yīng)液的配制,配制完成后充分震蕩混勻,10000 rpm離心5 s。按每管20μL分裝至0.2 ml PCR管中,并做好標(biāo)記,擴(kuò)增反應(yīng)液需現(xiàn)配現(xiàn)用。


    N人份(μL)

    PCR反應(yīng)液

    N+2×17

    酶混合液

    N+2×3

    總量

    N+2×20

      3. 加樣在樣品處理區(qū)進(jìn)行,冰上操作

    按陰性質(zhì)控品、待測(cè)樣品、陽(yáng)性質(zhì)控品的加樣順序,分別取5μL,加入至已分裝擴(kuò)增反應(yīng)液的八聯(lián)管中,反應(yīng)總體系為25μL。蓋緊管蓋,短暫離心后置于熒光定量PCR儀中,并記錄樣本擺放順序。

      4. 擴(kuò)增反應(yīng)(在擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行

    選擇FAM通道檢測(cè)H5亞型選擇HEX通道檢測(cè)N1亞型。按以下擴(kuò)增程序表設(shè)置PCR擴(kuò)增參數(shù)。

    步驟

    溫度

    時(shí)間

    循環(huán)數(shù)

    1

    逆轉(zhuǎn)錄

    50

    10min

    1

    2

    預(yù)變性

    95

    3min

    1

    3

    變性

    95

    10sec

    45cycle

    4

    退火延伸及熒光檢測(cè)

    55

    30 sec

    報(bào)告熒光:FAM、HEX;淬滅熒光:NONE




    企業(yè)愿景

      公司將一如既往的視誠(chéng)信為最重要的文化精神;在經(jīng)營(yíng)決策和管理的全過(guò)程中信守“以產(chǎn)品質(zhì)量、優(yōu)質(zhì)服務(wù)”為原則和“為人類健康服務(wù)”為宗旨的理念;融前沿科技、全球資源與優(yōu)質(zhì)人才為資本,以開拓創(chuàng)新、銳意進(jìn)取、精益求精之精神,科學(xué)管理之導(dǎo)向,凝聚員工、客商之合力,同舟共濟(jì),為實(shí)現(xiàn)人類的食品安全和生物醫(yī)藥業(yè)的高速發(fā)展不懈奮斗!

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